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L-色氨酸的比旋度測(cè)定

發(fā)表時(shí)間:2020-07-06  |  點(diǎn)擊率:1908

前言

 

L-色氨酸是人體和動(dòng)物所必需的 8 種必需氨基酸之一,不能通過(guò)自身合成,只能通過(guò)食物來(lái)攝取。L-色氨酸又被稱為第二必需氨基酸,目前廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、飼料等方面。隨著生產(chǎn)技術(shù)的不斷進(jìn)步,微生物法替代了傳統(tǒng)的化學(xué)合成法和蛋白質(zhì)水解法,占據(jù)了市場(chǎng)主導(dǎo)地位,主要產(chǎn)地集中在歐美、日本等少數(shù)地方。但目前在產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn) L-色氨酸的過(guò)程中,均會(huì)存留少量雜質(zhì),因此下游的分離純化工藝非常重要。

比旋光度是旋光物質(zhì)的重要物理常數(shù),可以用來(lái)檢測(cè) L-色氨酸的純雜程度,進(jìn)而為提L-色氨酸的生產(chǎn)效率提供參考。

儀器與試劑

 

2.1 儀器

GP80全自動(dòng)旋光儀

 

實(shí)驗(yàn)方法

 

3.1 實(shí)驗(yàn)步驟

(1) 色氨酸溶液

精準(zhǔn)稱取約 1.0g 色氨酸,加入適量水,在水?。?/span>60℃)中溫?zé)崛芙猓ㄈ葜?100mL, 制成每 1 mL 約含 10mg 的溶液。

(2) 空白測(cè)試

將控溫旋光管用三級(jí)水清洗 3 次以上,然后加滿水至管路中無(wú)氣泡。將旋光管水平放置于旋光儀中,連接溫控線,設(shè)置溫度 20℃,等待儀器溫度穩(wěn)定后,點(diǎn)擊“清零”。

 

(3) 樣品測(cè)試

將控溫旋光管取出,用色氨酸溶液清洗 3 次以上,然后加滿溶液至管路中無(wú)氣泡。等待儀器溫度穩(wěn)定后,點(diǎn)擊“測(cè)試”。

3.2 儀器參數(shù)

 

樣品名稱:色氨酸

測(cè)試次數(shù):3

樣品質(zhì)量:0.99952g

顯示位數(shù):3

試管長(zhǎng)度:10cm

結(jié)果類型:比旋度

溫度:20

測(cè)量準(zhǔn)確:高精度測(cè)量

結(jié)果與討論

 

4.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

 

編號(hào)

測(cè)試溫度

比旋度

平均值

 

1

 

 

20

-32.085

 

 

 

-32.11

-32.135

-32.135

 

2

-32.135

-32.035

-32.135

4.2 討論

兩次平行的結(jié)果均符合藥典中對(duì)于 L-色氨酸比旋度的要求(-30.0°~-32.5°),此實(shí)驗(yàn)?zāi)軌?/span>L-色氨酸的純度測(cè)定提供一定的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

 

[1] 陳榮慶,劉偉,.L-色氨酸的研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2014,(14):4438-4440,4443.

[2] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[M].二部.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2015:388.

注意事項(xiàng)

 

1、本次實(shí)驗(yàn)所用試劑和水,在沒有注明其他要求時(shí),均指分析純?cè)噭┖腿?jí)水。

2、色氨酸略溶于水(1.1g/100mL25℃),建議在水浴中溫?zé)崛芙?。建議先加入 50-60 mL 的水,攪拌溶解大部分樣品,再添加少量水至樣品全部溶解,再于冰水中冷卻至 20℃。后將樣品液和清洗液全部轉(zhuǎn)移至 100mL 容量瓶中,定容。也可使用超聲波儀器加速溶解。

3、溶液配制好后建議在 30min 內(nèi)測(cè)試完畢。

4、可通過(guò)旋光管兩側(cè)的透光玻璃孔觀察管中是否有氣泡,同時(shí)檢查并擦凈玻璃上的水漬和污跡。

5、為旋光管更換樣品液時(shí)建議將儀器的溫控關(guān)閉。操作方法是將參數(shù)設(shè)置里的“溫度” 選項(xiàng)關(guān)閉。

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